CRISPR基因编辑改造毕赤酵母高效合成聚羟基烷酸酯（PHA）的发酵工艺优化

梅健

浙江玖辰新材料科技有限公司，浙江杭州，311100；

摘要：聚羟基烷酸酯（PHA）是一类具有良好生物可降解性和力学性能的生物基高分子材料，广泛应用于医疗、生物包装和可持续材料领域。毕赤酵母（Pichia pastoris）作为一种工业化应用成熟的非传统模式微生物，因其较高的代谢灵活性和外源基因表达能力，逐渐成为PHA合成平台菌株的重要候选对象。本文基于CRISPR/Cas9系统对毕赤酵母进行靶向基因编辑，通过重构其碳代谢网络和引入PHA合成关键酶基因，实现高效PHA合成路径的构建。同时，结合碳源优化、发酵参数调节及在线监控系统，建立了一套高产、稳定、绿色的PHA发酵生产工艺。实验结果显示，经改造毕赤酵母在最优发酵条件下PHA产量提升至传统工程菌株的1.8倍，显著降低生产成本，为PHA规模化生产提供新思路与新模式。

关键词：CRISPR基因编辑；毕赤酵母；聚羟基烷酸酯（PHA）；代谢工程

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